UDC 615.322:615.451.1

Actuality. The widespread use of herbal drugs with anti-inflammatory and nephroprotective properties stimulates the search for new active biological substances. Of particular interest are plants from the Ranunculaceae family, especially Anemone nemorosa, which contains a range of potentially bioactive components such as anemonin, protoanemonin, and others. Understanding the acute toxicity, anti-inflammatory, and hypoazotemic activity of Anemone nemorosa extracts opens possibilities for the development of new therapeutic agents based on this plant. Materials and methods. Ethanol extracts were obtained from the aerial parts of Anemone nemorosa harvested during the flowering period. The study included the examination of oral acute toxicity conducted on Wistar rats over 14 days, anti-inflammatory activity using the carrageenan-induced paw edema method in Wistar rats, and hypoazotemic activity on models of healthy and acute renal failure in Wistar rats. Results. The extracts showed no acute toxicity at the administered dose. It was established that the oral administration of the extracts is non-toxic up to a dose of 200 mg/kg body weight. The anti-inflammatory tests did not reveal significant therapeutic effects. However, the hypoazotemic tests demonstrated a reduction in blood urea and creatinine levels, and an increase in these indicators in urine, especially under conditions of acute renal failure, indicating a strong diuretic effect of the extracts. Conclusions. The Anemone nemorosa extracts exhibited strong hypoazotemic and diuretic activity, which may be beneficial for the treatment of kidney diseases. The absence of anti-inflammatory activity requires further analysis and possible modification of extraction methods. The study results support the potential use of this plant in developing new nephroprotective phytopreparations. © O. Khropot, Yu. Konechnyi, G. Lavryk, I. Tymchuk, O. Pinyazhko, V. Lubenets, R. Konechna.

Author keywords

Acute toxicity; Anemone nemorosa; Anti-inflammatory activity; Extracts; Hypoazotemic activity; Ranunculacea

Вступ. Різке зростання кількости пацієнтів із мінно-вибуховими травмами через війну робить актуальною проблему колонізації ран військовослужбовців резистентними штамами Pseudomonas aeruginosa і Klebsiella pneumoniae та модифікації їхнього видового спектра на третьому етапі евакуації. Мета. З’ясувати частоту інфікування клебсієлами та псевдомонадами мінно-вибухових ран на третьому етапі евакуації, визначити спектр їхньої резистентности, чутливість до протимікробних лікарських засобів, подати загальні правила військово-медичної допомоги.

Матеріяли й методи. Мікробіологічні дослідження проводили відповідно до чинних нормативно-методичних матеріялів і методичних рекомендацій. Антимікробну чутливість досліджували згідно з рекомендаціями European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST), 2023. Щодо випадків інфікування під час надання медичної допомоги (ІПНМД) серед поранених військовослужбовців керувалися оновленим наказом Міністерства охорони здоров’я України №1447 «Про затвердження Зміни до Критеріїв, за якими визначаються випадки інфекційних та паразитарних захворювань, які підлягають реєстрації» від 15.07.2021 р.

Результати. Обстежено 38 осіб, у 17 виділено K. pneumoniae і P. аeruginosa, що становить 44,7 %. Інфекційні ускладнення ран віднесено до ІПНМД. 33,3 і 22,2 % ізолятів K. pneumoniae продемонстрували чутливість до амікацину та іміпенему відповідно. Чутливість до піперацилін-тазобактаму виявлено у 41,2 % ізолятів P. aeruginosa, іміпенему – 23,5 %, цефтазидиму – 11,8 %; помірну чутливість до амікацину – 29,4 %, тикарцилін-клавуланату – 23,5 %. У клебсієл і псевдомонад зафіксовано абсолютну чутливість до колістину. Отже, 92,3 % ізолятів псевдомонад і 90,7 % клебсієл виявилися мультирезистентними штамами. Своєчасне, ретельне первинне хірургічне оброблення ран, коректне протимікробне лікування знижують ризик їхнього інфікування.

 Висновки. У 44,7 % поранених виділено K. pneumoniae і P. аeruginosa на третьому етапі евакуації. Мультирезистентні штами K. pneumoniae і P. аeruginosa є шпитальними, частота їхнього висівання становить 90,7 і 92,3 % відповідно. Усі виділені ізоляти чутливі до колістину. Якісна підготовка хірургічної рани для подальших реабілітаційних етапів передбачає повну елімінацію з неї мікроорганізмів.

Ключові слова: K. рneumoniae, P. aeruginosa, множинна резистентність, мінно-вибухова травма

The capacity of opportunistic bacteria for biofilm formation plays an important role in the development of chronic inflammatory processes, which are difficult to treat. To improve antimicrobial therapy methods, the influence of lactobacilli on the ultrastructure of biofilm-forming clinical strains of staphylococci when co-cultured was investigated. 5 biofilm-forming clinical strains of S. aureus from the skin of acne vulgaris patients (n = 24) were isolated. Using transmission electron microscopy (TEM) the morphological changes of S. aureus cells in the mixed culture with standard strains of Lactobacillus plantarum 8P-A3 and clinical strains of L. fermentum (n = 4) were studied. It was found that in 48 hours after the inoculation on the medium of samples of mixed cultures of L. plantarum 8P-A3 and S. aureus growth of staphylococci was not revealed. Only in some cases of mixed cultures of L. fermentum and biofilmforming staphylococci was growth of S. aureus obtained. In electron diffraction patterns of control samples of 24-hour staphylococcal monocultures and 48-hour lactobacilli monocultures, natural development of the population at the cellular level was observed. Destructive changes under the influence of lactobacilli (probiotic and clinical strains) were detected in all ultrathin sections of the cells of biofilm-forming and planktonic staphylococci. Significant destructive changes in the cell wall of the staphylococci were observed: thickening, obtaining of irregular form, detachment of the cytoplasmic membrane, the complete destruction of the peptidoglycan layer and the emergence of "shadow cells". On all electron diffraction patterns fibrillar-threadlike structures of DNA could not be observed, but in some cases mesosome-like formations were poorly contrasted. It was established that the surface S-layer of lactobacilli was expressed on a significantly larger scale in the mixed culture with staphylococci. In mixed culture of clinical strains of lactobacilli with biofilm form of S. aureus, staphylococcal cells could be found in a dormant state. Thanks to an experimental model of biofilm in a mixed culture, the development of destructive changes of staphylococci under the influence of the lactobacilli both on the morphological and at the population levels has been assessed. The results obtained can be used in improving the schemes of complex antimicrobial therapy of pyoinflammatory processes with the use of biological preparations, which are composed of lactobacilli, including those in the form of local application.